三级生物安全防护水平是指实验室的操作、安全设备和设施适用于操作我国第二类(个别第一类）病原微生物（见第三章表BST-3）。这些致病微生物对工作人员的主要危害是与自身接种（自伤）、吞服和暴露于感染性气溶胶。三级生物安全防护水平有严格的一级防护屏障和二级防护屏障的要求，以防止相邻区域的工作员、社会和环境暴露于可能的感染性气溶胶。所有实验室操作应该在生物安全柜或其它密闭容器中进行，诸如气密型气溶胶发生柜。这一水平的二级屏障包括实验室的控制入口和为减少感染性气溶胶从实验室释放的特殊通风系统。

 1 设施要求

BSL-3实验室设施除满足BSL-1和BSL-2实验室设施的要求外，在平面布局、送排风系统等方面有其众多特殊设计，其主要设计原理是“围场效应”。主要有以下特征：

    (1)选址：

    BSL-3实验室对实验室所在环境没有要求，可与其他用途房屋设在一栋建筑物中，但必须自成隔离区。

    (2)平面布局：

    <1>BSL-3实验室包括实验室的实验间（核心区）、半污染区和清洁区，以及各区之间相连的缓冲间，缓冲间的门应能自动关闭并互锁；

    <2>在半污染区应设供紧急撤离使用的安全门;

    <3>人员必须经过缓冲间进入实验室;

    <4>隔离区或隔离门入口处应采用防止节肢动物和啮齿动物进入的设计;

    <5>Ⅱ级或III级生物安柜的安装位置应远离实验间入口，避开工作人员频繁走动的区域，且有利于形成气流由“清洁”区域流向“污染”区域的单向气流流型。

    (3)围护结构：

    <1>实验室（含缓冲间）围护结构内表面必须光滑、耐腐蚀、防水，以易于消毒清洁。所有缝隙必须可靠密封：

    <2>实验室内所有的门均能自动关闭：

    <3>地面应无渗漏，光洁但不滑；不使用地砖和水磨石等有缝隙地面；

    <4>天花板、地板、墙间的交角均为圆弧形且可靠密封，施工时应防止昆虫和老鼠钻进墙脚

    (4)通风空调：

    <1>必须安装独立的通风空调系统以控制实验室气流方向和压力梯度。该系统必须确保实验室使用时，室内空气除通过排风管道高效过滤排出外，不得从实验室的其他部位或缝隙排向室外：同时确保实验室内的气流由“清洁”区域流向“污染”区域;

    <2>进风口和排风口的布局应该是对角分布，上送下排，矢流方向较为合适，应使实验室的死空间降低到最小程度;

    <3>通风空调系统为直向型，不得采用回风系统;

    <4>由生物安全柜排出的经内部高效过滤的空气可通过系统的排风管直接排至大气。应确保生物安全柜与排风系统的压力平衡;

    <5>实验室的进风应经初、中、高效三级过滤，保证实验间的静态洁净度为万级，半污染区为10万级;

    <6>实验室的排风必须高效过滤或加其他方法处理后直接向空中排放。该排风口应远离系统进口位置;

    <7>进风和排风高效空气过滤器必须安装在实验室进风管道的末端和排风管道的茼端，以免污染风道;

    <8>高效空气过滤器的安装必须牢固;

    <9>实验室的通风系统中，在进风和排风总管处应安装气密型密闭阀，必要时可完全关闭以进行室内化学熏蒸消毒;

    <10>实验室的通风系统中使用的所有部件必须为气密型。所使用的高效空气过滤器不得为木框架和纸隔板结构.

    <11>应安装风机启动自动联锁装置，确保实验室启动时先开排风机后开送风机。关闭时先关送风机后关排风机：

    <12>在污染区和半污染区内不应另外安装分体空调、暖气和电风扇等。

2 环境参数请见2.2.

         3 设备要求

         (1)生物安全柜

    BSL-3实验室必须安装和使用生物安全柜，应根据病原微生物试验活动的内容的不同，选择不同型别的生物安全柜。各级生物安全柜的性能及选用原则见第九章BST-20～22和附录4。

    (2)高压灭菌器

    在BSL-3实验室的半污染区和清洁区之间，宜安装双扉生物安全型高压灭菌器，即高压灭菌器跨墙安装，双门互锁结构，且对高压产生的蒸汽具有回收再高压的性能。高压灭菌器的安装，必须确保高压灭菌器与墙体之间的密封，不能有一点泄漏。污染区内应设置不排蒸汽的高压蒸汽灭菌器或其他消毒装置。

    (3)离心机安仝罩

    是否需要离心机安全罩，取决于离心机的类型。如果是传统型的离心机，最好安装离心机安全罩：如果离心机是新式生物安全型的，即负压离心机或有离心杯帽的离心机，则不需要离心机安全罩。离心机和安全罩宜靠近排风口。

    (4)洗手装置

应在污染区和半污染区出口处设洗手装置。洗手装置的供水应为非手动开关。供水管应安装防回流装置。不得在实验室内安设地漏。下水道应与建筑物的下水管线完全隔离，且有明显标识。下水应直接通往独立的液体消毒系统集中收集，经有效消毒后处置。

4 个人防护

  BSL-3实验室的个人防护除符合BSL-2的要求外，还应该符合下列要求：

    (A)工作人员在进入实验室时必须使用个体防护装备，包括两层防护服、两层手套、生物安全专业防护口罩（不应使用医用外科口罩等），必要时佩戴眼罩、呼吸保护装置等。工作完毕必须脱下工作服，不得穿工作服离开实验室。可再次使用的工作服必须先消毒后清洗；

    (B)在实验室中必须配备有效的消毒剂、眼部清洗剂和生理盐水，且易于取用。实验室区域内应配备应急药品。