1、一级生物防护实验室的配置（BSL-1）

　　一级生物安全水平是实验室操作、安全设备和设施适应于从事具明确生物特征的、已知在健康成人中不引起疾病的、活的微生物菌（毒）株研究的生物安全防护永平。适用于教学用实验室，适用于我国第四类危害的微生物(见病原微生物实验室生物安全BST-3，BST为Bio-safety table的缩写，下同)。然而，许多通常与人类疾病不相关的病原微生物是条件致病性的，在特定情况下，可以在儿童、老年人、免疫缺陷的和免疫抑制的个体中引起感染。对于在体内已经繁殖多代的疫苗株不要简单地认为是无毒的。一级生物安全防护水平不需要特殊的一级和二级屏障，除需要洗手池外，依靠标准的微生物操作即可获得基本的防护水平。

　A 设施要求

　　在实验室设计时，应特别关注能够造成实验室生物危害的主要因素，包括：①气溶胶的形成；②处理大容量和／或高浓度微生物；③人员过多或设备过多；④啮齿动物和节肢动物大量孳生；⑤未经允许人员进入实验室：⑥工作流程中使用一些特殊的样品和试剂。

　　BSL-1实验室的设计和设施方面应满足以下要求：

　　(1)应为安全运行以及清洁和维护提供充足的空间。

　　(2)实验室的墙壁、天花板和地板应当是光滑、易清洁、不渗水以及耐化学品和消毒剂的腐蚀。地板应当是防滑的，同时应尽可能地避免管线暴露在外。

　　(3)实验台应当密封于墙上，不渗水，可耐消毒剂、酸、碱、有机溶液的腐蚀，并能适度耐热。

　　(4)在实验室内进行操作时应保证照明，避免不必要的反光和闪光。

　　(5)实验室内的设备应当摆放稳定，在实验台和其他设备之间及其下面要保证有宽敞的空间以备清洗。

　　(6)应当有足够的存储空间来摆放物品以方便使用，从而预防在实验台和走廊内造成混乱。最好在实验室工作区域外提供其他长期使用的存储空间。

　　(7)应当为安全地操作及储存溶剂、放射性物质、压缩气体和液化气提供足够的空间和设备。

　　(8)在实验室的工作区域外应当有存放外衣和私人物品的设备。

　　(9)每个实验室都应该有洗手池，洗手池最好安装在出口处。

　　(10)实验室的窗子和门入口处应安装防媒介昆虫和啮齿动物的纱窗和挡板。

　B 环境参数：

　　<1>相对于实验室外部，其内部保持负压。实验间（污染区）的相对压力以(40±5)Pa为宜，半污染区与实验间之间的缓冲间的相对压力为30Pa，半污染区的相对压力以(20±5)Pa为宜，清洁区与半污染区之间的缓冲间的相对压力为10Pa，清洁区为室外大气压；

　　<2>实验室内的温度以人体舒适范围为宜，相对湿度以不超过70%为宜，或根据工艺要求而定;

　　<3>实验室内的空气洁净度以1万～10万级为宜;

　　<4>实验室人工照明应均匀，不炫目，不反光，工作照度不高于500lx;

　　<5>实验室内噪声不超过65dB。

　　(6)其他：

　　<1>实验台表面应防水，耐腐蚀、耐热；

　　<2>实验室中的家具应牢固。为便于清洁，各种家具和设备之间应保持一定距离。应用专门放置生物废物容器的台（架）。家具和设备的边角和突出部位应圆滑、无毛刺；

　　<3>所需真空泵应放在实验室内。真空管线必须装置在线高效过滤装置。真空泵工作时，不能影响室内负压的有效梯度;

　　<4>压缩空气钢瓶等应放在实验室外。穿过围护结构的管道与围扩结构之间必须有效密封。气体管线必须安装在线型高效过滤装置和防回流装置内。工作时不能影响室内负压的有效梯度;

　　<5>实验室安全出口应有长效发光指示标志。

　C 设备要求

　　BSL-1实验室对高压灭菌器、离心机安全罩没有要求，生物安全柜要求I型生物安全柜。

　D 个人防护

　　个人防护的内容包括防护用品和防护操作程序。实验室所有人员必须经过个人防护的必要培训，考核合格获得相应资质，熟悉所从事工作的风险和实验室特殊要求后方可进入实验室工作。实验室应按照分区实施相应等级的个人防护。实验室操作必须严格遵守个人防护原则。工作人员进入BSL-1实验室应穿工作服，实验操作时应戴手套，必要时佩戴防护眼镜。离开实验室时，工作服必须脱下并留在实验区内。不得穿工作服进入办公区等清洁区域。用过的工作服应定期消毒。

 

2、二级生物安全防护实验室 (BSL-2) 的配置

·　　二级生物安全防护水平是实验室的操作、安全设备和设施适用于操作我国的第三类(少量二类）危害的致病微生物(见病原微生物实验室生物安全 表BST-3)。二级生物安全防护水平适合从未知病原的人身上取血、体液和组织。接触这些致病微生物的工作人员的主要危害是与感染性材料的偶然的皮肤或粘膜破损、或吞食感染性食物。必须强调对污染的针头或利器的使用要非常谨慎。对未知的可通过气溶胶途径传播的微生物、具有可以增加工作人员暴露的可能气溶胶或高度飞溅物的危险。二级生物安全防护水平微生物操作必需在一级生物安全防护水平的基础之上，增加生物安全柜、高压火菌器、安全离心机罩帽、防溅罩或面罩等。

　A 设施要求

　　BSL-2实验室的设计和设施方面应在满足BSL-1实验室设施的基础上，增加以下内容：

　　(1)实验室的门应能够自动关闭，有可视窗。

　　(2)有适当的火灾报警器。

　　(3)实验室不需特殊的通风设备。但在计划安装新的设备时，应当考虑要设置通风系统，使空气向内流动而不发生循环。如果没有通风系统，那么实验室窗户应当能够打开，同时要安装防虫的纱窗。

　　(4)应有可靠的动物保证和应急照明设施。

　B 环境参数与一级生物防护实验室的环境参数要求相同.

　C 设备要求

　　(1)生物安全柜

　　根据实际情况选用合适的II级生物安全柜。生物安全柜应安装在BSL-2实验室内气流流动小，人员走动少，离门和中央空调送风口较远的地方。生物安全柜的周围应有一定的空间，与墙壁至少保持30cm的距离，便于清洁环境卫生。

　　(2)高压灭菌器

　　高压灭菌器应选择立式或台式不排气（产生的蒸汽被回收）的，放置在BSL-2实验室内，或门外。

　　(3)心机安全罩

　　不需要离心机安全罩。

　　(4)洗眼器

　　应根据实验活动内容，确定是否需要安装洗眼器。如果需要洗眼器，则应安装在BSL-2实验室内靠近出口的地方。

　D 个人防护

　　BSL-2除符合BSL-1的要求外，还应该符合下列要求：

　　进入实验室时，应在工作服外加罩衫或穿防护服，戴帽子、口罩。一次性手套不得清洗和再次使用。当微生物的操作不可能在生物安全柜内进行，而必须采取外部操作时，为防止感染性材料溅出或雾化危害，必须使用面部保护装置（如：护目镜、面罩、个体呼吸保护用品或其他防溅出保护设备）。

 

3、三级生物安全防护实验室(BSL-3)的配置

　　三级生物安全防护水平是指实验室的操作、安全设备和设施适用于操作我国第二类(个别第一类）病原微生物（见第三章表BST-3）。这些致病微生物对工作人员的主要危害是与自身接种（自伤）、吞服和暴露于感染性气溶胶。三级生物安全防护水平有严格的一级防护屏障和二级防护屏障的要求，以防止相邻区域的工作员、社会和环境暴露于可能的感染性气溶胶。所有实验室操作应该在生物安全柜或其它密闭容器中进行，诸如气密型气溶胶发生柜。这一水平的二级屏障包括实验室的控制入口和为减少感染性气溶胶从实验室释放的特殊通风系统。

　A 设施要求

　　BSL-3实验室设施除满足BSL-1和BSL-2实验室设施的要求外，在平面布局、送排风系统等方面有其众多特殊设计，其主要设计原理是“围场效应”。主要有以下特征：

　　(1)选址：

　　BSL-3实验室对实验室所在环境没有要求，可与其他用途房屋设在一栋建筑物中，但必须自成隔离区。

　　(2)平面布局：

　　<1>BSL-3实验室包括实验室的实验间（核心区）、半污染区和清洁区，以及各区之间相连的缓冲间，缓冲间的门应能自动关闭并互锁；

　　<2>在半污染区应设供紧急撤离使用的安全门;

　　<3>人员必须经过缓冲间进入实验室;

　　<4>隔离区或隔离门入口处应采用防止节肢动物和啮齿动物进入的设计;

　　<5>Ⅱ级或III级生物安柜的安装位置应远离实验间入口，避开工作人员频繁走动的区域，且有利于形成气流由“清洁”区域流向“污染”区域的单向气流流型。

　　(3)围护结构：

　　<1>实验室（含缓冲间）围护结构内表面必须光滑、耐腐蚀、防水，以易于消毒清洁。所有缝隙必须可靠密封：

　　<2>实验室内所有的门均能自动关闭：

　　<3>地面应无渗漏，光洁但不滑；不使用地砖和水磨石等有缝隙地面；

　　<4>天花板、地板、墙间的交角均为圆弧形且可靠密封，施工时应防止昆虫和老鼠钻进墙脚

　　(4)通风空调：

　　<1>必须安装独立的通风空调系统以控制实验室气流方向和压力梯度。该系统必须确保实验室使用时，室内空气除通过排风管道高效过滤排出外，不得从实验室的其他部位或缝隙排向室外：同时确保实验室内的气流由“清洁”区域流向“污染”区域;

　　<2>进风口和排风口的布局应该是对角分布，上送下排，矢流方向较为合适，应使实验室的死空间降低到最小程度;

　　<3>通风空调系统为直向型，不得采用回风系统;

　　<4>由生物安全柜排出的经内部高效过滤的空气可通过系统的排风管直接排至大气。应确保生物安全柜与排风系统的压力平衡;

　　<5>实验室的进风应经初、中、高效三级过滤，保证实验间的静态洁净度为万级，半污染区为10万级;

　　<6>实验室的排风必须高效过滤或加其他方法处理后直接向空中排放。该排风口应远离系统进口位置;

　　<7>进风和排风高效空气过滤器必须安装在实验室进风管道的末端和排风管道的茼端，以免污染风道;

　　<8>高效空气过滤器的安装必须牢固;

　　<9>实验室的通风系统中，在进风和排风总管处应安装气密型密闭阀，必要时可完全关闭以进行室内化学熏蒸消毒;

　　<10>实验室的通风系统中使用的所有部件必须为气密型。所使用的高效空气过滤器不得为木框架和纸隔板结构.

　　<11>应安装风机启动自动联锁装置，确保实验室启动时先开排风机后开送风机。关闭时先关送风机后关排风机：

　　<12>在污染区和半污染区内不应另外安装分体空调、暖气和电风扇等。

　B 环境参数与一级生物防护实验室的环境参数要求相同.

　C 设备要求

　　(1)生物安全柜

　　BSL-3实验室必须安装和使用生物安全柜，应根据病原微生物试验活动的内容的不同，选择不同型别的生物安全柜。各级生物安全柜的性能及选用原则见第九章BST-20～22和附录4。

　　(2)高压灭菌器

　　在BSL-3实验室的半污染区和清洁区之间，宜安装双扉生物安全型高压灭菌器，即高压灭菌器跨墙安装，双门互锁结构，且对高压产生的蒸汽具有回收再高压的性能。高压灭菌器的安装，必须确保高压灭菌器与墙体之间的密封，不能有一点泄漏。污染区内应设置不排蒸汽的高压蒸汽灭菌器或其他消毒装置。

　　(3)离心机安仝罩

　　是否需要离心机安全罩，取决于离心机的类型。如果是传统型的离心机，最好安装离心机安全罩：如果离心机是新式生物安全型的，即负压离心机或有离心杯帽的离心机，则不需要离心机安全罩。离心机和安全罩宜靠近排风口。

　　(4)洗手装置

　　应在污染区和半污染区出口处设洗手装置。洗手装置的供水应为非手动开关。供水管应安装防回流装置。不得在实验室内安设地漏。下水道应与建筑物的下水管线完全隔离，且有明显标识。下水应直接通往独立的液体消毒系统集中收集，经有效消毒后处置。

　D、个人防护

　　BSL-3实验室的个人防护除符合BSL-2的要求外，还应该符合下列要求：

　　(A)工作人员在进入实验室时必须使用个体防护装备，包括两层防护服、两层手套、生物安全专业防护口罩（不应使用医用外科口罩等），必要时佩戴眼罩、呼吸保护装置等。工作完毕必须脱下工作服，不得穿工作服离开实验室。可再次使用的工作服必须先消毒后清洗；

　　(B)在实验室中必须配备有效的消毒剂、眼部清洗剂和生理盐水，且易于取用。实验室区域内应配备应急药品。

 

4、生物实验室安全操作规程

　A.  BSL-1和BSL-2实验室

　　(1)实验室的进入

　　①实验室负责人应限制人员进入实验室。未经批准，任何人不得进入实验室工作区域。儿童不得进入实验室工作区域。对可以增加获得性感染的危险性或感染后可能引起严得后果的人员不允许进入实验室或动物房;

　　②BSL-2实验室门上应标有国际通用的生物危害警告标志（见BSF-1，BSF为Bio-safety figure的缩写，下同），包括通用的生物危险性标志，标明传染因子、实验室负责人或其他人姓名、电话以及进入实验室的特殊要求;

　　③实验室的门应保持关闭;

　　④工作人员进入动物房应当经过特别批准;

　　⑤与实验室工作无关的动物不得带入实验室。

　　(2)工作人员的防护要求

　　①在实验室工作时，必须穿着合适的工作服或防护服;

　　②工作人员在进行可能接触到血液、体液以及其他具有潜在感染性的材料或感染性动物的操作时，应戴上合适的手套。手套用完后，应先消毒再摘除，随后必须洗手;

　　③在处理完感染性实验材料和动物后，以及在离开实验室工作区域前，都必须洗手;

　　④为了防止眼睛或面部受到喷溅物的污染、碰撞或人工紫外线辐射的伤害，必须戴合适的安全眼镜、面罩（面具）或其他防护设备;

　　⑤严禁穿着实验室防护服离开实验室工作区域;

　　⑥不得在实验室内穿露脚趾的鞋;

　　⑦禁止在实验室工作区域进食、饮水、吸烟、化妆和处理角膜接触镜;

　　⑧禁止在实验室工作区域储存食品和饮料;

　　⑨在实验室内用过的防护服不得和日常服装放在同一柜子内。

　　(3)有关操作的指导原则

　　①严禁用口吸移液管，严禁将实验材料置于口内。严禁舔标签;

　　②所有的实验操作要按尽量减少气溶胶和微小液滴形成的方式来进行;

　　③应限制使用注射针头和注射器。除了进行腔道外注射或抽取实验动物体液外，注射针头和注射器不能用于移液或用作其他用途;

　　④实验室应制订并执行处理溢出物的标准操作程序。出现溢出、事故以及明显或可能暴露于感染性物质时，必须向实验室负责人报告。实验室应如实记录有关暴露和处理的情况，保存相关记录;

　　⑤污染的液体在排入到生活污水管道以前必须清除污染。根据所处理的微生物因子的危险度评估结果准备专门的污水处理系统;

　　⑥只有保证在实验室内没有受到污染的文件纸张才能带出实验室。

　　(4)实验室工作区的管理原则

　　①实验室应保持清洁整齐，严禁摆放与实验无关的物品;

　　②每天工作结束后应清除工作台面的污染。若发生具有潜在危害性的材料溢出应立即清除污染;

　　③所有受到污染的材料、标本和培养物在废弃或清洁再利用之前，必须先清除污染;

　　④感染性材料的包装和运输应遵循国家和／或国际的相关规定;

　　⑤如果窗户可以打开，则应安装防止节肢动物进入的纱窗。

　　(5)生物安全管理的指导原则

　　①实验室负责人负责制订和采用生物安全管理计划以及实验室安全或／和操作手册;

　　②实验室应当能提供常规的实验室安全培训，并建立培训制度;

　　③实验室负责人（或生物安全负责人）要将生物安全实验室的特珠危害告知实验室人员，同时要求他们阅读生物安全／或操作手册。所有实验室人员必须经过培训，了解所从事工作的危险、掌握有关的管理规定和操作程序，通过考核后方可从事相关实验室工作;

　　④应当制订节肢动物和啮齿动物的控制方案;

　　⑤如有必要，应为所有实验室人员提供适宜的医学评估、监测和治疗并建立健康档案。实验室人员应接受与所操作生物因子或实验室内潜在的生物因子相关的免疫接种或检测。

　B.  BSL-3实验室

　　除下列原则以外，BSL-3实验室其余的运行规范与BSL-1和BSL-2实验室相同：

　　(1) SL-3实验室的设立和使用必须符合《病原微生物实验室生物安全管理条例》(2004

　　年第424号国务院令)的有关规定。

　　(2)张贴在实验室入口门上的国际生物危害警告标志（见BSF-1）应注明生物安全级别以及管理实验室出入的负责人姓名，并说明进入该区域的所有特殊条件，如免疫接种状况等。

　　(3)实验室防护服应为长袖、背面开口的隔离衣或连体衣，应穿着鞋套或专用鞋。实验室防护服不能在实验室外穿着，且必须在清除污染后再清洗。最好使用一次性连体防护服。

　　(4)开启各种潜在感染性物质的操作均必须在生物安全柜或其他类似的防护设施中进行。

　　(5)有些实验室操作，或在进行感染了某些病原微生物的动物操作时，必须配备呼吸装备。

　　(6)实行双人工作制，严禁任何人单独在实验室内工作。

　　(7)实验记录未经可靠消毒不得带出实验室。为保证安全，通常使用传真进行原始记录的传输。

　　(8)工作人员应开展健康监测。在开始工作前应收集并妥善保存工作人员的基线血清。

 BST-1  个人防护装备的用途

 

    

 

授权人员方可进入

生物安全水平_______________________

责任人_____________________________

紧急联系电话_______________________

白天电话__________家庭电话______­___

必须得到上述责任人的授权方可进入

BSF-1 张贴于实验室门的生物危害警示标志